1。介绍
乳酸菌(LAB)是发酵产品(牛奶)的常见居民,
肉类和蔬菜)和胃肠道,其中大部分是负责的。
保持健康宿主微生物群的平衡。这组bachow
引用本文:vantsawa,P.A.,
Maryah,UT和蒂莫西,B.(2017)隔离
乳酸菌的鉴定
益生菌发酵潜力
牛奶(不)在unguwar日升
卡杜纳州尼日利亚。美国杂志
分子生物学,7,99-106.。
https://doi.org/10.4236/ajmb.2017.72008
收稿日期:2016年11月9日
接受:2017年4月27日
发布时间:2017年4月30日
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科学研究出版公司
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开放存取
P. A. Vantsawa等人。
一百
标准的具有殖民胃肠道,因此发酵碳水化合物的能力
以乳酸为主要代谢终产物
帮助消化。它也作为宿主的一部分好处,防止致病的作用。
通过抑制物质(代谢产物)产生微生物
形成生物膜保护肠粘膜
[ 1 ] [ 2 ]。
作为食品原料的牛奶及其制品的消费可以追溯到几千年前。
年。虽然它没有任何科学依据,直到被观察到。
经常食用大量酸牛奶的保加利亚农民
牛奶作为日常饮食的一部分,其生存年龄更长[ 3 ]。他认为,
发酵牛奶的消费会逆转肠道的副作用。
宿主动物微区系。发酵牛奶对健康有益。
主人的健康[ 4 ]。可行的实验室含乳制品已作为预防药
治疗感染沙门氏菌的成人肠道感染
乳糖不耐症【5】【6】。
益生菌是活的微生物,对宿主有益于健康。
改善肠道微生物平衡[ 7 ] [ 8
]。某些实验室种(乳酸菌),
Streptococcus,肠球菌属和Pediococcus)被称为活跃的候选人
几个研究人员对益生菌在人类和动物中的应用[ 4 ]。
乳酸菌作为食品中潜在的健康促进益生菌的选择
药物制剂需要对某些标准进行体外筛选,其中
包括抗生素耐受性,胆汁耐受性,抑制其他微生物的生长。
和胃液,允许它们在肠道内建立。
道。因此,本研究是以隔离的目的进行的。
从发酵牛乳识别Lactobacilli(NONO)和体外
抗生素、胆汁和微生物抑制耐受性的测定。
2。材料与方法
共有五(5)纳米样品从不同的地方收集无菌袋
在unguwan日升市场,卡杜纳州。样品运送
该实验室在冷箱和储存在冰箱在−4˚C隔离
实验室
夫人(De Mans,Rogosa和夏普)琼脂或肉汤培养基
根据制造商的要求,用无菌水进行称重和重组。
指令(泰坦生物技术有限公司,印度)和消毒121˚C
15psi冷却15分钟前。
每组25毫升,在无菌生理盐水中匀浆。
连续稀释到10−6用无菌吸管通过转移了
1 ml生理盐水10毫升的培养在无菌试验的稀释液9毫升
管.枚举的实验室是由移液和电镀出适当的做
采用琼脂稀释。板孵育在一个倒置的方式在37˚C
48小时。孵育后,菌落计数并记录为菌落。
形成单位(CFU)。形态不同的菌落亚培养。
反复在琼脂平板上进行纯化。实验室培养保持在
P. A. Vantsawa等人。
一百零一
MRS琼脂斜面4˚C和传代,每4周。
用48小时的培养后对菌株进行了表征:宏观
形态、海拔、大小和色素沉着的检查;显微镜检查
通过革兰氏染色;生长在15 C和45 C和˚˚;生化方法[ 9 ]
[ 10 ]。利用API 50进一步鉴定实验室菌株
CHL系统(生物梅里埃®法国)。
涂片固定是通过传播全环进行隔离玻璃幻灯片上
在3次低火焰上传递。涂片用1%结晶紫覆盖,
Lugol的碘溶液和95%乙醇洗涤,2% safarin染色
在光镜下观察。
一滴3%过氧化氢(H2O2)被添加到一个loopfullab文化。
实验室接种于5ml胰蛋白胨肉汤培养基在37˚C
24hrs。孵育后加入五(5)科瓦奇试剂0.5%滴。
轻轻摇动混合。
试验培养接种在SIM卡的斜面上。24小时培养,接种于5毫升磷酸葡萄糖胨中。
水在37˚C孵育24小时。孵化后,下降0.02%
加入甲基红溶液。
使用API 50 CH盒不同菌株的快速鉴定(鉴定)
这是一个标准化的系统,用来区分实验室菌株。
菌株水平。孵化盘中的威尔斯被无菌蒸馏水灌满。
为了创造潮湿的气氛,在托盘上放置了相应的条带。纯
文化孵育24小时收获到安瓿含不育
蛋白胨水。在安瓿(2麦克法兰)的细菌悬浮液分发。
到mediathen成条状的微管避免使用吸管
泡沫的形成。威尔斯被无菌矿物油实现厌氧
在37˚C孵育48小时。基于颜色变化的反应
对每一口井进行了研究,解释为阴性、阳性或可疑。识别
结果经数值分析得到。
使用apiwebtm(版本5.1)。
抗生素敏感性试验如[ 11 ]所述。MRS琼脂
制备了0.1毫升的乳酸菌菌株。
制备了标准的药敏试验盘(sigma奥德里奇)。
应用于平板表面,孵育1