糖尿病与糖尿病肾病易患2型糖尿病多态性关联

1。介绍

糖尿病肾病（DN）是一个长期的慢性微血管并发症的糖尿病，

导致终末期肾病[ 1 ]。它是由蛋白尿和/或蛋白尿发生在糖尿病患者中定义的。

没有证据表明糖尿病患者肾条件[ 2 ]。它的特点是动脉血升高。

压力、肾小球滤过率（GFR）下降、心血管病发病率和死亡率高风险【3】。

葡萄糖转运体（GLUT）包括一家便利的转运蛋白分为三类[ 4 ]。

GLUT1是1班的一员，它的高表达在肾小球，肾小球系膜、内皮细胞和足细胞

[ 5 ]。GLUT1基因（SLC2A1）（rs841853）位于染色体1p34.2，它包含10个外显子和

9个内含子[ 6 ] [ 7 ]。它在DN发病中起重要作用，在细胞的肾小球的表达

肾小球系膜细胞有望增加基础葡萄糖摄取量（8），并激活细胞通路。

在细胞生长和细胞外基质积聚中[ 9 ]。的表达和活性

系膜细胞GLUT1在糖尿病患者中有很大的个体差异主要归因于遗传因素。

从这个角度看，很清楚为什么只有一组糖尿病患者倾向于发展。

也可以阐明血糖控制与进展的相关性较差的原因。

糖尿病患者的肾病（10）。因此，研究糖尿病肾病的遗传易感性。

糖尿病肾脏病变的发病机制。几个单核苷酸多态性

（SNP）GLUT1基因已在有关DN的检查，而XbaI G＞T，位于

内含子2，这代表鸟嘌呤（G）的颠换到胸腺嘧啶（T）[ 9 ]。

来自世界各地的研究相互矛盾的数据做了关于G→T GLUT1 XbaI多态性的关系

关于DN [ 1 ] [ 9 ]，以及在埃及人口中没有关于这个问题的研究的事实，得出了结论。

值得注意的是研究这种多态性。

2。对象与方法

2.1。研究参与者的选择

我们对227名糖尿病患者进行了病例对照研究。

亚历山大大学研究所。所有入选本研究的患者被诊断为2型糖尿病。

糖尿病（DM）根据美国糖尿病协会的标准（艾达）[ 11 ]。一

从同一人群中招募了100名健康受试者。这项研究向所有参与者解释。

需要书面知情同意书。实验设计得到了当地伦理的认可。

委员会和所有与会者都给予了知情同意。所有糖尿病患者口服降糖药。

代理人.

根据艾达的指导原则，在第一次尿液采集的尿样中测量白蛋白。

早上去鉴别肾病。因此，糖尿病患者被分为非糖尿病肾病患者。

（DM−DN）患者尿白蛋白正常的正常白蛋白尿（＜30毫克/克尿

肌酐为糖尿病肾病患者（糖尿病肾病患者）尿白蛋白持续升高。

（≥排泄30毫克/克尿肌酐）基于至少连续通宵的共识

3至6个月期间收集的样本[ 11 ]。

一般的排除标准包括：DM2与病程小于10年、1型糖尿病、继发性糖尿病，

吸烟、妊娠、心脏衰竭、既往诊断糖尿病肾病。尿样采集过程中；

急性发热、糖尿病酮症酸中毒、尿或血尿明显，或患者进行过度

排除24小时内运动，并在条件分解后重复。超声检查

排除其他非糖尿病性有机肾脏疾病。

2.2。检查、取样和生化分析

所有受试者均接受标准化体格检查，并提供详细的诊断病史。

糖尿病并发症及接受抗糖尿病治疗的类型。人体测量

（体重和身高）和体重指数的计算。

在一夜之间禁食12小时后，每个参与者提取了八毫升的静脉血；

全部EDTA血药用于基因组DNA提取，血清用于常规临床。

化学（尿素、肌酐、尿酸、甘油三酯、胆固醇及其高密度组分）。

此外，测定尿中尿白蛋白和肌酐。糖化血红素

R. A. Ramadan等人。

七十三

采用免疫比浊法测定。分析在OLYMPUS AU400临床进行

化学分析仪（贝克曼库尔特公司，布莱德CA，美国）。低密度脂蛋白组分的计算

的friedwald公式，估算的肾小球滤过2.3。对GLUT1基因XbaI多态性分型

使用市售试剂盒提取基因组DNA（QIAGEN）。提取的浓度和纯度

通过nanodroptm 1000分光光度计测定DNA（赛默飞世尔科技）在260

280 nm。聚合酶链反应在veriti热循环仪进行（Applied Biosystems）根据

该方法通过grabellus等人描述。（2010）[ 12 ]。PCR反应是在总体积内进行的。

25μL，含10μL的基因组DNA，12.5毫升的dreamtaq™绿色PCR Master Mix，20 pmol

每个引物，2.1 L L的核酸酶自由水。引物序列；提出了5’- TGC AAC CCA TGA

GCT AAC AA-3“反5”-天CCC AGC法案CTG标签CC-3”[ 12 ]。pcr程序初步变性

94˚C 3 min退火和延伸为45 30个周期的94˚C和45 C和56˚

72˚C 45 S，最后一个7分钟的拓步72˚C. PCR产物用限制性酶切XbaI

酶（罗氏分子dagnostics，德国）和37˚C孵育1小时。突变型，

鸟嘌呤（G）横与胸腺嘧啶（T），并取消了识别位点。因此，t等位基因没有

含XbaI酶切位点仍然未消化的305 bp的片段，而G等位基因的收益率232—

和73 bp片段[ 12 ]。用3%琼脂糖凝胶电泳法对产物进行了电泳分析。

用溴化乙锭染色在光显示（图1）。在5%的样本基因分型中

一式两份，完全一致。

2.4。统计分析

满足正态分布的连续结果均为均值-标准差。学生的

采用t检验、卡方检验和Fisher精确检验评价各组间的一般特征。

Hardy Weinberg3