白芍不同炮制品主要化学成分含量的变化研究

雷素华 刘 康

安岳县中医医院，四川资阳642350

摘要：目的研究白芍不同炮制品的化学成分含量。方法采用紫外分光光度法、高效液相色谱法对白芍不同炮制品中的水溶性多糖、鞣质和芍药苷进行测定。结果与生白芍相比，白芍炮制品的芍药苷含量，具有一定程度的下降，而酒炙白芍中的水溶性多糖百分含量明显升高，鞣质的百分含量也明显升高，清炒白芍和醋炙白芍中的鞣质和水溶性多糖的百分比含量有一定的降低。结论白芍不同炮制品中水溶性多糖、鞣质、芍药苷等化学成分含量不同。

关键词：白芍；芍药苷；白芍水溶性多糖；化学成分

中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1671-5837(2015)25-0180-02

白芍是毛莨科植物芍药的干燥根，白芍具有平肝止痛、养血调经等作用，在中医药中使用的历史悠久，具有多种炮制方法，如现在常用的炮制方法有“土制”、“醋制”、“炒制”等，我国的药典中收录了白芍、酒白芍、炒白芍三种饮片的炮制方法。白芍经过相应的炮制后，药理作用会得到明显的增加，不同的炮制品在临床上的应用也不同，目前对于白芍炮制品的研究，主要侧重于芍药苷等小分子的成份和其药理活性。白芍的炮制品中，除了小分子成份外，还有鞣质、多糖等，在临床上，正是这些成分的协同作用，才能使其发挥出相应的药理作用。本文主要对白芍不同炮制品的鞣质、水溶性多糖和芍药苷的成份含量进行研究，希望能给白芍不同炮制品的临床应用，提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

实验采用的仪器设备主要为高效液相色谱仪(岛津LC-20A)、紫外可见分光光度计、电子分析天平(万分之一、十万分之一)、电热恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、打粉机、电热恒温干燥箱，超声仪，150ml带塞锥形瓶、玻璃漏斗、滤纸等；试药及试剂有：乙醇，甲醇，硫酸、氢氧化钠、磷酸（均为分析纯），甲醇、乙腈（色谱纯），采用的对照品中，芍药苷（批号：13022801；纯度：99.17%；生产单位：中国食品药品检定研究院）和没食子酸（中国生物制品检定所提供）；白芍药材10kg（由四川佛都药业有限公司提供），经过相关的基源鉴定和理化鉴定为毛莨科植物芍药的干燥根，其质量符合《中国药典》2010年版标准。

取白芍药材适量(10kg)，按白芍的炮制工艺进行加工制成白芍饮片，备用。炒白芍，按炒白芍的炮制工艺（清炒法），取若干白芍饮片，将其放入到炒制容器中，用文火加热，到白芍呈微黄色为止，摊晾，然后将白芍取出去除碎屑，备用。酒白芍，按酒白芍的炮制工艺（酒炙法），取白芍饮片2kg，黄酒0.4kg（100:20比例用量），用黄酒将白芍拌匀，闷润2小时，待黄酒被吸尽后进行炒制，置炒制容器内用中火不断翻炒至干燥，表面呈深黄色，微带焦斑，取出摊晾，备用。醋白芍，按醋白芍的炮制工艺（醋炙法），取白芍饮片2kg，食醋0.4kg（100:20比例用量），用食醋将白芍拌匀，闷润2h，待食醋被吸尽后进行炒制，置炒制容器内用中火不断翻炒至干燥，表面呈黄褐色，微带焦斑，取出摊晾，备用。

1.2 测定方法

1.2.1 水溶性多糖的测定

首先称葡萄糖标准品13.31毫克，放入到100毫升的容量瓶中，加入蒸馏水配置成每毫升0.1331毫克的溶液，作为对照品溶液；然后取白芍0.5克，利用无水乙醇索式提取2个小时，加入50毫升的水，回流2个小时，然后精密移取滤液25毫升左右；精密移取对照品溶液8份，从0.1到0.8毫升，每隔0.1毫升一份，然后加入适量的蒸馏水，将8份溶液变成1毫升，然后每份溶液中加入1毫升5%的苯酚和5毫升浓硫酸，放入到沸腾的水中加入，15分钟左右显色后，将温度迅速降到室温，采用相同的方法用1毫升蒸馏水作为对照，最后放到490纳米处测定吸光度，用吸光度和葡萄糖质量浓度做回归分析，得到回归方程为Y=1.809X-0.0017，相关系数r为1，线性范围在每毫升1.89到15.22微克之间。

精密度实验采用对照品溶液0.6毫升，按照上面的方法进行显色，用蒸馏水进行空白对照实验，在490纳米下测定吸光度，连续测量5次，RSD为0.38%，说明实验的精确度较高；稳定性实验用试品液按照上述的方法显色测定吸光度，每5分钟测量1次，共测量6次，然后每隔30分钟测量1次，结果为显色后1.5小时内稳定性良好；重复性实验取样品粉末0.5克，按照上述的显色测定吸光度，平行6份进行实验，结果RSD为1.98%；样品含量测定取试品溶液0.5毫升，放入到10毫升封闭的试管中，同时用等量的蒸馏水作为空白对照实验，在490纳米处测定吸光度。

1.2.2 白芍中鞣质的测定

首先称取没食子酸对照品5.31毫克，放入到100毫升棕色量瓶中，加水溶解后为对照品溶液，试品溶液的制备，采用药材粉末1克，放到250毫升的棕色量瓶中，加入水150毫升，经过一夜的放置，采用超声进行处理，时间为10分钟，然后用水进行稀释，等到固体物沉淀后，精密量取滤液20毫升，再加入到100毫升的棕色量瓶中，用水进行稀释摇匀，得到食品溶液。

鞣质含量的测定，首先测定总多酚的含量，精密量取试品溶液2毫升，放入到25毫升棕色量瓶中，加入10毫升的水和1毫升的磷钼钨酸，然后加入浓度为29%的碳酸钠溶液到刻度线，摇匀后放置20分钟，利用相同的市级作空白对照实验，在760纳米的波长处，测定样品的吸光度，依据标准的曲线，计算样品中的多酚的含量。

精密度实验采用1毫升试品溶液，按照上述测定方法，连续测量5次，结果RSD为0.69%，说明实验仪器具有很好的精密度；稳定性实验按照上述的方法测定，每个10分钟测量1次，联系测量6次，然后再每隔30分钟测定1次，结果显示在2个小时内稳定；重复性实验取相同的样品粉末1克，共取6份，进行平行实验，按照相同的方法和仪器等，制取样品溶液6份，然后测定鞣质的含量，结果RSD为2.14%。

1.2.3 芍药苷含量的测定

芍药苷是白芍的主要成分，按《中国药典》2010版标准和规定的方法对白芍不同炮制品的芍药苷进行含量测定。

色谱条件与系统适用性试验：色谱柱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、150mm）；以乙腈-0.1％磷酸溶液(14：86)为流动相；紫外检测器（检测波长为230nm）。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定（十