张 强
徐州医学院遗传学教研室,江苏徐州221004
摘要:目的:研究黄芩苷对帕金森病小鼠模型的影响。方法:60只雄性C57BL小鼠随机分为模型组、黄芩苷组、美多巴组、正常对照组。模型组小鼠腹腔注射30mg/kgMPTP;黄芩苷组分别给予100mg黄芩苷灌胃和腹腔注射30mg/kgMPTP;美多巴组给予31mg/kg美多巴灌胃,1/d,15d.正常组给予等量生理盐水,1次/d,15d。对4组小鼠的运动功能、脑纹状体DA、脑组织GSHGSH-Px、MDA含量进行测定和统计分析。结果:模型组小鼠的悬挂实验、游泳实验分值均明显比黄芩苷组、美多巴组和正常对照组高(P<0.05);黄芩苷组的脑纹状体DA水平、GSH水平均明显比美多巴组和模型组高(P<0.05);黄芩苷组小鼠的脑纹状体GSH-Px、MDA水平均显著低于美多巴组和模型组(P<0.05)。结论:黄芩苷预防给药能够有效保护帕金森病小鼠的神经功能,其作用机制可能与促进脑内抗氧化物质GSH水平的有效提升有相关联系。
关键词:黄芩苷;帕金森病小鼠模型;运动功能
中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1671-5837(2015)25-0191-02
帕金森病属于一种神经系统退行性疾病,老年人是多发人群,近年来其发病率呈现逐年上升的趋势[1-8]。黄芩苷是黄酮类中药的有效成分,是由黄芩中提取而来,具有明显的抗氧化性,能够有效清除羟自由基、过氧亚硝基等[9-10]。给予黄芩苷有助于增强机体抗氧化性,本研究对76 只雄性C57BL小鼠的相关资料进行了统计分析,观察了黄芩苷对帕金森病小鼠模型的影响。报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
76只雄性C57BL小鼠(模型组(22 只)、黄芩苷组(22只)、美多巴组(16 只)、正常对照组(16 只)4 组。、黄芩苷、盐酸多巴胺、谷胱苷肽过氧化酶(GSH-Px)试剂盒、谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)
1.2 方法
给予模型组小鼠腹腔注射MPTP,浓度为30 mg/kg,1 次/d,连续注射3d;给予黄芩苷组小鼠100 mg /kg,黄芩苷灌胃,1次/d,连续使用15 d,灌胃后第8天给予小鼠腹腔注射30mg MPTP,1 次/d,连续注射3d;给予美多巴组小鼠美多巴灌胃治疗,浓度为31 mg,1次/d,给予正常组小鼠等量生理盐水,持续灌注7d。
1.3 观察指标
悬挂实验:将小鼠悬挂在一水平电线上,1 分= 小鼠两前爪均无法将电线抓住,2 分= 小鼠用一前爪将电线抓住,3 分= 小鼠用两前爪将电线抓住,4 分= 小鼠躯体上举;游泳实将4 组小鼠的悬挂实验和游泳实验得分计算出来,然后将其详细记录[4]。
运用HPLC 法对小鼠脑纹状体多巴胺(DA)含量进行测量。对小鼠的运动功能进行有效检测后将其处死,在冰上放置,称重取出来的脑纹状体,并将其和5倍量0.1 mol /L 高氯酸混匀,在低温离心机中放置并进行离心运动,在4℃条件下,以10000 r /min 离心20 min,分析上清液色谱。色谱柱LunaC-18(250mm ×4. 6mm,5μm),流动相甲醇为0.05 mol/L,磷酸氢二钠为0.02 mol /L,柠檬酸为5%∶72%∶23% ,流速为1. 0mL /min,检测波长为280nm,柱温25 ℃[5]。
将小鼠脑组织纹状体取出后严格依据试剂盒说明书中的方法测定其余脑组织的MDA、GSH、GSH-Px含量[6]。
1.4 统计学处理
对本研究中所有数据进行统计学处理的过程中运用统计学软件SPSS 20.0,用均数±标准差(x±s),t检验组间比较表示计量资料,用P<0. 05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 4 组小鼠的运动功能测定结果比较
鼠的悬挂试验分值均明显比黄芩苷、美多巴组和正常对照组高(P <0. 05),悬挂实验分值越高,小鼠抓住电线越牢固;说明小鼠肢体运动协调情况越好,反之,则说明
小鼠震颤、肌强直等情况严重;模型组小鼠的游泳实验分值明显比美多巴组、正常对照组以及黄芩苷组低(P <0. 05),游泳分值越高小鼠游泳的时间越多;说明小鼠肢体运动协调情况越好,反之,则说明小鼠震颤、肌强直等情况严重,见表1。
2.2 4 组小鼠的脑纹状体DA、脑组织MDA、GSH、GSH-Px 含量测定结果比较
黄芩苷组的脑纹状体DA 水平、GSH 水平均明显比美多巴组和模型组高(P<0.05);黄芩苷组小鼠的脑纹状体GSH-Px、MDA水平均显著低于美多巴组和模型组(P<0.05),见表2。
参考文献
[1]吴正治,高小威,李映红.内源性MSCs 向脑内迁移分化为多巴胺能神经元及其中药干预的可行性研究[J].深圳中西医结合杂志,2010,20(5):269-271.
[2]吴正治,ANDREW C H,朱庆伟,等.安颤灵对泛素-蛋白酶体通路损伤细胞模型的保护作用[J].中华神经医学杂志,2009,8(9):877-880.
[3]熊珮. 黄芩苷对帕金森病大鼠多脑区铁积聚及黑质DMT1、FP1的影响[D]. 首都医科大学,2013.
[4]陈忻,张楠,赵晖,等. 黄芩苷对鱼藤酮致帕金森大鼠黑质多巴胺能神经的保护作用[J]. 中风与神经疾病杂志,2008 25:174-177.
[5]宋扬文,陈忻,张楠,等. 黄芩苷抑制鱼藤酮帕金森病大鼠黑质铁积聚及作用机制[J]. 中国药理学通报,2011,27:1740-1744.
[6]宋扬文