穴位埋线对更年期雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

更年期综合征又称围绝经期综合征，是由于卵巢功能逐渐减退，血中雌激素水平波动或下降，从而引起植物神经功能失调为主，伴有神经心理症状的一组症候群。近年来研究发现本病有发病年龄提前、发病率上升的趋势，且其发病与中枢神经递质的紊乱密切相关??[1]? 。本实验通过观察穴位埋线对去势更年期模型大鼠下丘脑中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5?羟色胺(5?HT)、5?羟吲哚乙酸(5?HIAA)含量的影响，探讨其对更年期综合征防治作用的机理。现报道如下。　　?

　　1　材料与方法?

　　1?1　 实验动物及造模??[2]?　 选用60只3～4 月龄健康清洁级SD 雌性未孕大鼠， 体质量(200 ±20)?g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2006?0015，饲养环境合格证号：0009161，实验前将动物置于室内适应环境1周，室温18?℃~22?℃，湿度40%~60%。将实验动物随机分为治疗组、模型组和假手术组各20只，其中治疗组和模型组在200?mg/L乌拉坦腹腔麻醉下，腹位固定，行双侧卵巢摘除术，术后5?d阴道涂片，连续5?d，观察造模是否成功;假手术组仅行麻醉和腹位固定，不予卵巢摘除。数学论文发表?

　　1?2　主要试剂与仪器　NE、DA 、5?HT 、5?HIAA标准物由Sigma 公司提供; 正丁醇由广州威佳公司提供;RF?540 型荧光分光光度计(日本);高速冷冻离心机(美国);SN?695型γ计数器(上海核福光电仪器有限公司)。?

　　1?3　治疗方法　造模成功后，治疗组用支架固定，根据华兴邦等??[3]?制定的大鼠穴位图谱选取肾俞、子宫、三阴交穴进行穴位埋线治疗，其中子宫、三阴交穴取仰卧位，肾俞选俯卧位，选好穴位后以医用安尔碘严格消毒，医者用一次性注射器7号针头作针管，以华佗牌不锈钢针灸针(0?3?mm×30?mm，剪去针尖)作针芯，穿好0?5?cm长0型肠线后将注射针头迅速刺入穴位，到达肌层后将针芯轻轻推入，边推针芯边退针管，出针后用棉签轻压片刻即可。1次/周，连续埋4周为1个疗程。模型组和假手术组不埋线，仅用注射针头刺激穴位。?

　　1?4　样品制备及检测方法　末次埋线治疗12?h后，在乌拉坦麻醉下迅速断头处死后立即剖取下丘脑，在冰皿上精确称取下丘脑第三脑室周围组织，于冰玻璃板上分离出下丘脑， 称质量后分别加10 倍体积的冷酸性正丁醇， 用玻璃匀浆器在冰水中匀浆。若脑组织质量低于300?mg， 则用3?mL酸性正丁醇匀浆，质量不足部分用双蒸水补充， 其量为不足脑组织质量的80% ， 匀浆液离心5?min (2 000?r/min ) ， 取上清液2?5?mL 备用。参照文献[2]法测定下丘脑中NE、DA、5?HT、5?HIAA 含量，同时计算5?HT/NE比值。　?

　　1?5　统计学方法　采用SPSS 10?0软件进行数据处理。?

　　2　结果?

　　表1结果显示，模型组较假手术组的DA、NE水平显著降低(?P<0?05或P?<0?01)，5?HT、5?HIAA水平则显著上升(?P<0?01或P?<0?001)，5?HT/NE比值显著升高(?P?<0?001);而埋线组与模型组比较可显著升高NE水平(?P?<0?05)，降低5?HT、5?HIAA水平(?P<0?05或P?<0?01)，且埋线组的5?HT/NE比值亦显著降低(?P?<0?01)，但对DA无显著影响(?P?>0?05)。表1　各组大鼠脑组织神经递质含量比较?统计方法：?t检验;①P<0?05，②P<0?01，③P<0?001，与假手术组比较;④P<0?05，⑤P?<0?01，与模型组比较

3　讨论?数学论文发表

　　更年期综合征是以卵巢功能的退行性改变为中心环节，进而影响全身各系统而产生的一系列综合症候群。植物神经功能紊乱是更年期综合征的主要表现，对植物神经递质的测定成为探讨更年期综合征发病机理的热点之一。范红霞等??[4]?的动物实验结果表明：去卵巢大鼠与正常对照组比较，脑组织中5?HT、5? HIAA的含量以及5?HT/NE比值均显著升高。正常情况下中枢内的神经递质分泌保持在一定水平， 且比例协调， 以维持稳定的功能。随着机体的老化， 神经递质也相应地发生增龄性改变， 进而可能诱发潮热、抑郁等多种植物神经功能紊乱的症状。王滨等??[2]?通过实验研究发现， 更年期大鼠下丘脑内儿茶酚胺(CA) 类递质水平发生明显衰退， NE 较青年对照组明显下降; 吲哚类递质5?HT 和5?HIAA 的含量却随增龄而增加。陈亚琼??[5]?认为女性更年期患者潮热、出汗及更年期综合症状评分指数均与5?HT及5?HIAA呈正相关。本实验中我们发现， 去势大鼠下丘脑内CA类递质水平发生明显衰退，NE、DA水平较假手术组显著下降; 吲哚类递质5?HT 和5?HIAA 的含量显著增加。原因可能是CA类递质的合成代谢呈低水平状态， 而分解代谢有所增强。同时由于大鼠下丘脑内5?HT 的代谢及神经活性相应增强， 而CA能使神经活性减弱， 从而使5?HT与NE的比值上升， 打破了原有的正常生理环境， 进而引发多种病理变化。?

　　中医认为肾虚是本病的核心病机，在肾虚基础上损及冲任，并累及肝脾。故治疗上重在补肾，调理冲任，兼调和肝脾。以肾俞、三阴交和子宫为主穴，其中肾俞为肾之背俞穴，为肾之精气汇聚之所，取之可益肾填精，生髓养神;三阴交为肝脾肾三经的交会穴，而冲任带三脉与肝脾肾关系密切，取之可调补冲任，疏理肝脾，补益三脏;子宫穴为经外奇穴，位居双侧卵巢解剖位置体表投射区所在。以异性蛋白羊肠线在此3个穴位进行埋线可以达到持久的良性刺激作用。本研究表明，穴位埋线后可提高去势大鼠下丘脑下降的NE水平， 降低异常升高的5?HT 与5?HIAA 水平，从而使5?HT与NE比值下降并接近正常值， 说明穴位埋线能纠正下丘脑单胺类神经递质的紊乱，通过对下丘脑—垂体—卵巢轴的良性调整作用，最终达到治疗更年期综合征的作用。
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